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【摘要】：一氧化氮(NO)是生物體內(nèi)的一種信使分子和效應(yīng)分子,在生理和病生過程中起重要作用,自90年代以來一直是各國科學(xué)家研究的熱點(diǎn)。因NO為小分子化合物一氧化氮探頭,在有氧的條件下極不穩(wěn)定(t_(1/2)6s),測定難度大一氧化氮探頭,故相關(guān)分析方法的研究受到極大的關(guān)注。目前常用的測定NO含量的化學(xué)方法多屬間接測定法一氧化氮探頭,即測定其代謝終產(chǎn)物NO_2~-或(和)NO_3~-乙醇檢測儀,如比色法。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)NO可以與含鐵卟啉的生物分子發(fā)生反應(yīng),改變其吸收光譜,在特性波長下吸收度的改變與體系中NO濃度相關(guān)的特性,研究了以細(xì)胞色素C( C一氧化氮探頭, CytC)為敏感材料的吸光型NO生物傳感器。本文以酸性條件下的為NO源,建立了吸光型NO生物傳感器對NO的測定方法,并用該生物傳感器研究了NO供體藥物的體外釋放通路天然氣報(bào)警器,并考察了一些藥物對體外小鼠腹腔巨噬細(xì)胞合成NO的影響。本課題包括以下幾個部分:(一) 吸光型NO生物傳感器探頭的研制本部分實(shí)驗(yàn)就傳感器敏感材料——CytC的固定方法進(jìn)行了篩選和比較。分別以金溶膠自組裝法,殼聚糖共價結(jié)合法、溶膠凝膠技術(shù)的包埋法對CytC進(jìn)行固定。通過對固定膜的表觀性狀及其對NO響應(yīng)性能的考察一氧化氮探頭,全面評價了這幾種固定方法的特點(diǎn)。結(jié)果表明以/復(fù)合膜的性能最好,響應(yīng)時間為

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