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（六）培養(yǎng)

打開電源開關(guān)，打開氣泵，設(shè)定溫度至所需溫度，（應(yīng)緩慢升溫）設(shè)定時(shí)間至最大值，打開過(guò)濾器上進(jìn)氣閥門和進(jìn)罐閥門和呼吸器上進(jìn)氣閥和排氣閥，調(diào)節(jié)氣的翻騰度和壓力至0.03MPa，待壓力穩(wěn)定和溫度穩(wěn)定后（打開外套加熱開關(guān)）即可。

每天觀察館內(nèi)料液的顏色，聞呼吸器排出的氣味并在火焰保護(hù)下取樣，劃平板，記錄，接取樣瓶，根據(jù)館內(nèi)情況適當(dāng)加大或減少通氣量。詳細(xì)流程請(qǐng)參考：的方法。

培養(yǎng)注意事項(xiàng)：

1，液體菌種接種以后培養(yǎng)過(guò)程中通氣時(shí)要先小量通氣，當(dāng)培養(yǎng)液菌球數(shù)量達(dá)到50%以后再加大通氣量。

2，在液體菌種培養(yǎng)過(guò)程中從接種以后的每24小時(shí)取樣檢測(cè)一次。取樣的過(guò)程中要嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)流程操作。杜絕取樣造成的2次污染。

3，鏡檢方法簡(jiǎn)介如下：

無(wú)菌環(huán)境下取含有菌絲的培養(yǎng)液，放到載玻片上，在用蓋玻片蓋好，放到顯微鏡觀測(cè)架上可燃?xì)怏w報(bào)警器，通過(guò)目鏡調(diào)整適當(dāng)倍數(shù)觀測(cè)菌絲形態(tài)結(jié)構(gòu)液體接種槍的結(jié)構(gòu)，是否有鎖狀聯(lián)合甲烷檢測(cè)儀，是否有細(xì)菌，病毒等不明微生物感染等情況。

（七）放液接種

看菌種的菌絲量，菌球量，當(dāng)菌絲量達(dá)到90%以上時(shí)，平板檢測(cè)液體接種槍的結(jié)構(gòu)，取樣瓶檢測(cè)無(wú)雜菌污染時(shí)方可接種。將接種管道消毒后與發(fā)酵罐在火焰保護(hù)下對(duì)接（管道用棉花塞住）接種槍與槍頭同樣在火焰下對(duì)接液體接種槍的結(jié)構(gòu)，對(duì)接好的接種管道在調(diào)節(jié)好壓力時(shí)。打開出菌種閥門，將菌種從接種槍放出一部份，用量筒測(cè)試出10mL的時(shí)間，之后再兩到三人的配合下接種，接種時(shí)將槍頭插入料袋用力握槍，在所需時(shí)間內(nèi)拔出并松開接種槍并蓋好料袋塞子（接種前接種室要提前消毒，接種時(shí)不得說(shuō)話并戴口罩，手套，不得在接種室內(nèi)走動(dòng)）。

接種注意事項(xiàng):

1,接種前要嚴(yán)格檢測(cè)液體菌種是否感染，保持疑似感染，堅(jiān)決不用的原則。嚴(yán)格監(jiān)控菌齡，超齡菌種不宜使用。

2，接種過(guò)程中嚴(yán)格控制接入菌種量，定時(shí)校槍，預(yù)防空槍接種。

3，接種后控制培養(yǎng)溫度，不宜過(guò)低使液體菌種迅速萌發(fā)，以保障成活率。

（八）清洗

使用完畢的發(fā)酵罐即時(shí)清洗，清洗時(shí)不得留死角，清洗完畢后加水至內(nèi)層與外層的試鏡中心，加水完畢后蓋好壓緊待下次使用，定期檢查閥門，加熱管等是否正常。

簡(jiǎn)述液體菌種后期發(fā)酵培養(yǎng)的制作過(guò)程和培養(yǎng)好以后的接種流程，關(guān)于液體菌種生產(chǎn)技術(shù)暫時(shí)告一段落，有不明白的朋友歡迎大家在【液體菌種200問(wèn)】的文章下方留言討論。更多液體菌種生產(chǎn)技術(shù)資料可以點(diǎn)擊本文下方的相關(guān)鏈接查閱。